碧迪生物科学BD Pharmingen 试剂精选

Imag磁珠分选、凋亡、增殖与周期、BDCBA多重蛋白定量技术 、T细胞研究、ELISA/ELISPOT、BD Phosflow 磷酸化蛋白流式分析、WB/IHC/IP/IF/Bioimg、干细胞完整解决方案

1、机器日程维护和质控很重要，一定要记得使用质控微球

2、样本制备推荐产品：红细胞裂解液和滤网

3、FC受体阻断剂：避免FC非特异性反应

     Fc受体是指细胞表面能够与免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM、IgE和IgD)集合的分子。其广泛存在于NK细胞、肥大细胞、巨噬细胞、中性粒细胞的表面。FcR能够与抗体的Fc段结合，在检测时产生假阳性。使用FcR阻断剂，可以消除假阳性，降低检测背景，获得更清晰的结果。

4、凋亡试剂盒/周期/增殖

5、新机器要用起来，准备开始流式实验！选抗体,BD,BD,还是BD.. ！ 可以按照如下搭配好的panel直接选择

常见human Panel搭配

6、常用mouse Panel搭配

其他常见搭配/辅助试剂

7、细胞因子检测看过来，BD CBA多因子检测方法省钱、省时间、省样本
   ——50ul样本最多检测30多种细胞因子，有了流式细胞仪，方便！

CBA经典产品

8、磁珠分选和分选型仪器仪器使用更配哦，超高性价比！

磁珠分选经典产品：

9、补偿微球

由于荧光光谱的重叠现象，在进行流式多色分析时，必须设置单染管进行荧光补偿。OneComp/UltraComp eBeads微球大小和淋巴细胞相当，可连接各种荧光标记的抗体来调节补偿。每滴微球中都含有两群：一群是可以结合抗体的阳性群，一群是不会与抗体反应的阴性群。

优点：

   •使用方便，一滴即可

   •与所有小鼠、大鼠和仓鼠来源的抗体反应，要求抗体来源是Kappa
   
   •适用于各种激发光—适用于488nm蓝光，532nm绿光，561nm黄光，633-635nm红光，UltrComp eBeads尤其适用紫外紫色（405nm）激光器。

1）CompBead Compensation Particles 通用补偿微球

2）CompBead Plus Particles 补偿大微球，适用于larger cell types, for example, human embryonic stem cells (hESCs)

10、细胞死活鉴定染料 Fxiable Viability Stain(FVS)Reagents

为什么要鉴定细胞死活？

 • 死细胞非特异性染色使细胞背景增高，影响检测灵敏度
 • 鉴定细胞生命活性
 • 死细胞假阳性染色结果影响真实实验结果比例

与传统染料PI、7-AAD相比的优势？适用于胞内染色的死活细胞鉴定

  ①、PI、7-AAD的染色通常是放在其他抗体孵育完成后进行，不能洗涤即要上机检测；

  ②、对于胞内抗体的染色，由于经过了固定步骤，PI或7-AAD染色后所有的细胞都有阳性，所以它们只适合胞膜染色的死活细胞鉴定。

  ③、PI、7-AAD与常用染色通道PE、PercP是统一检测通道，二者只能选择其一使用。PI和7-AAD发射谱很宽，488nm蓝色激光发射基本上580BP和690BP都被占用，这样大大减小多色试验中的配色增加了调补偿的难度。

  ④、Fixable Viability Dye的优点是：

  —固定、破膜以及洗涤步骤不影响Fixable Viability Dye的染色

  —FVS系列光谱多样，适合各种染色组合的搭配。FVS系列分别对应不同的激光器，发射波长不同，波谱集中。

Fixable Viability Dye使用原理

FVS为氨基反应性染料，与细胞表面或者内部的蛋白不可逆的结合。FVS是染细胞表面或膜内侧的游离胺，活细胞弱阳。正是由于和PI、7-AAD原理不同，所以对于一些需要固定破膜步骤的试验FVS一样适用，如果固定破膜后细胞发生死亡，该染料还是能反应细胞的死活情况，这点是核酸染料所不能替代的。